Abstract Objective: to evaluate the quality of the sputum sample before and after the Nursing guidance to patients. Methods: this is a quasi-experimental research design, single group type, before and after, non-randomized study. The study enrolled patients with suspected pulmonary tuberculosis, respiratory symptomatic patients for over three weeks, aged over 18 years, of both genders and without tuberculosis history in the last two years. The educational intervention consisted of individualized guidance on the collection of sputum sample, which was based on the guidelines of the Ministry of Health of Brazil and on the explanatory folder delivery. Results: in this study participated 138 patients with suspected pulmonary tuberculosis. The results showed significant increase of the samples with purulent particles, volume greater than 5 mL and increased rate of patients diagnosed with tuberculosis, after the educational intervention. Conclusion: it was shown that after the educational intervention, it was observed sputum samples with better quality, with satisfactory aspect and volume for the effectiveness of the bacilloscopic examination.

Resumen Objetivo: evaluar la calidad de la muestra de esputo antes y después de las orientaciones de Enfermería al paciente. Métodos: de estudio con diseño de investigación casi experimental, del tipo grupo único, antes y después, no aleatorio. Participaron del estudio pacientes con sospecha de tuberculosis pulmonar, sintomáticos respiratorios por más de 3 semanas, mayores de 18 años, de los dos sexos y sin antecedente de tuberculosis en los últimos dos años. La intervención educativa consistió en orientaciones individualizadas sobre la recolección de la muestra de esputo, fundamentadas en las directrices del Ministerio de la Salud de Brasil y en la entrega de folder explicativo. Resultados: participaron 138 pacientes con sospecha de tuberculosis pulmonar. Los resultados evidenciaron un importante aumento de las muestras con partículas purulentas, volumen mayor que 5mL y aumento en la tasa de pacientes diagnosticados con tuberculosis, después de la intervención educativa. Conclusión: se comprobó que, después de la intervención educativa, se obtuvieron muestras de esputo con mejor calidad, con aspecto y volumen satisfactorios para efectividad del examen de baciloscopía.

Resumo Objetivo: avaliar a qualidade da amostra de escarro antes e após as orientações de Enfermagem ao paciente. Métodos: estudo com delineamento de pesquisa quase experimental, do tipo grupo único, antes e depois, não randomizado. Participaram do estudo pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar, sintomáticos respiratórios por mais de três semanas, maiores de 18 anos, de ambos os sexos e sem antecedente de tuberculose nos últimos dois anos. A intervenção educativa consistiu em orientações individualizadas sobre a coleta da amostra de escarro, fundamentadas nas diretrizes do Ministério da Saúde do Brasil e na entrega de folder explicativo. Resultados: participaram 138 pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar. Os resultados evidenciaram importante acréscimo das amostras com partículas purulentas, volume maior que 5mL e aumento na taxa de pacientes diagnosticados com tuberculose, após a intervenção educativa. Conclusão: comprovou-se que, após a intervenção educativa, obtiveram-se amostras de escarro com maior qualidade, com aspecto e volume satisfatórios para efetividade do exame baciloscópico.

Resumo Objetivo: avaliar a qualidade da amostra de escarro antes e após as orientações de Enfermagem ao paciente. Métodos: estudo com delineamento de pesquisa quase experimental, do tipo grupo único, antes e depois, não randomizado. Participaram do estudo pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar, sintomáticos respiratórios por mais de três semanas, maiores de 18 anos, de ambos os sexos e sem antecedente de tuberculose nos últimos dois anos. A intervenção educativa consistiu em orientações individualizadas sobre a coleta da amostra de escarro, fundamentadas nas diretrizes do Ministério da Saúde do Brasil e na entrega de folder explicativo. Resultados: participaram 138 pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar. Os resultados evidenciaram importante acréscimo das amostras com partículas purulentas, volume maior que 5mL e aumento na taxa de pacientes diagnosticados com tuberculose, após a intervenção educativa. Conclusão: comprovou-se que, após a intervenção educativa, obtiveram-se amostras de escarro com maior qualidade, com aspecto e volume satisfatórios para efetividade do exame baciloscópico.

Abstract Objective: to evaluate the quality of the sputum sample before and after the Nursing guidance to patients. Methods: this is a quasi-experimental research design, single group type, before and after, non-randomized study. The study enrolled patients with suspected pulmonary tuberculosis, respiratory symptomatic patients for over three weeks, aged over 18 years, of both genders and without tuberculosis history in the last two years. The educational intervention consisted of individualized guidance on the collection of sputum sample, which was based on the guidelines of the Ministry of Health of Brazil and on the explanatory folder delivery. Results: in this study participated 138 patients with suspected pulmonary tuberculosis. The results showed significant increase of the samples with purulent particles, volume greater than 5 mL and increased rate of patients diagnosed with tuberculosis, after the educational intervention. Conclusion: it was shown that after the educational intervention, it was observed sputum samples with better quality, with satisfactory aspect and volume for the effectiveness of the bacilloscopic examination.

Resumen Objetivo: evaluar la calidad de la muestra de esputo antes y después de las orientaciones de Enfermería al paciente. Métodos: de estudio con diseño de investigación casi experimental, del tipo grupo único, antes y después, no aleatorio. Participaron del estudio pacientes con sospecha de tuberculosis pulmonar, sintomáticos respiratorios por más de 3 semanas, mayores de 18 años, de los dos sexos y sin antecedente de tuberculosis en los últimos dos años. La intervención educativa consistió en orientaciones individualizadas sobre la recolección de la muestra de esputo, fundamentadas en las directrices del Ministerio de la Salud de Brasil y en la entrega de folder explicativo. Resultados: participaron 138 pacientes con sospecha de tuberculosis pulmonar. Los resultados evidenciaron un importante aumento de las muestras con partículas purulentas, volumen mayor que 5mL y aumento en la tasa de pacientes diagnosticados con tuberculosis, después de la intervención educativa. Conclusión: se comprobó que, después de la intervención educativa, se obtuvieron muestras de esputo con mejor calidad, con aspecto y volumen satisfactorios para efectividad del examen de baciloscopía.

Investigou-se por métodos bacteriológicos (cultivo) e moleculares (PCR - Restriction Enzyme Analysis, PRA), a presença de micobactérias ambientais em águas de torneira, soluções e luvas cirúrgicas, utilizadas nas etapas dos procedimentos cirúrgicos executados no centro cirúrgico do Hospital Universitário Getulio Vargas (HUGV), na cidade de Manaus-Amazonas/Brasil. Foram colhidas e analisadas 105 amostras sendo: 24 de águas (colhidas das 2 torneiras existentes no centro cirúrgico), 8 de solução de Povidine e 7 de solução de Clorhexidina, que servem para a higienização das mãos dos cirurgiões; 39 de luvas cirúrgicas (superfícies internas e externas); e 27 de soluções que foram efetivamente utilizadas durante o ato cirúrgico. Por método bacteriológico obteve-se 41 isolados micobacterianos apenas de águas das torneiras. Pelo PRA obteve-se a detecção de DNA micobacteriano somente na amostra de água que forneceu acima de 100 colônias de micobactérias por tubo semeado. Os isolados foram identificados como sendo Mycobacterium celatum perfil 2, M. gordonae perfil 3, M. gordonae perfil 6, M. intracellulare perfil 1, M. lentiflavum perfil 3 e M. mucogenicum perfil 1. O encontro de M. mucogenicum, espécie já incriminada em surtos pós-cirúrgicos, indica que devem ser efetuados procedimentos de limpeza e monitoramento em todos os pontos de distribuição de águas, visando à prevenção de surtos de micobacterioses nosocomiais induzidos pelo uso das águas nas diferentes atividades de manuseio ou higienização dos pacientes submetidos a procedimentos invasivos.

Using bacteriological (culture) and molecular (PCR - Restriction Enzyme Analysis, PRA) methods, we investigated the presence of environmental mycobacteria in tap water, antiseptic solutions and surgical gloves, used in carrying out surgical procedures at the Getúlio Vargas University Hospital Surgical Center, in Manaus -Amazonas/Brazil. Samples (105) were collected and analyzed from: tap water (24 - collected from 3 taps in the surgical center); povidone-iodine solution, PVP-I, (8); Chlorhexidine solution (7), that were used to hygienize surgeons' hands; surgical gloves (39); and solutions that were effectively used during the surgical procedure (27). Using bacteriological method 41 mycobacteria were isolated, all from samples of tap water. Using PRA, mycobacterial DNA was detected only in the sample from water that provided over 100 colonies per inoculated culture tubes. The isolated were identified as Mycobacterium celatum pattern II, M. gordonae pattern III, M. gordonae pattern VI, M. intracellulare pattern I, M. lentiflavum pattern III and M. mucogenicum pattern I. The isolating of M. mucogenicum, a species that had already been incriminated for causing post-surgical outbreaks in tap water from the surgical center, indicates that cleaning and monitoring procedures must be carried out in every place of water distribution. This may be necessary to prevent nosological mycobacteriosis outbreaks induced by the use of water in different activities such as handling and hygienizing patients submitted to invasive procedures.

OBJETIVO: Propor uma metodologia para caracterizar proficiência na pesquisa de bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) em baciloscopias de escarro para diagnóstico da tuberculose, assim como determinar o número necessário de baciloscopias para estabelecer essa proficiência, a qualidade da transcrição dos resultados, as causas das discordâncias nas leituras (leitor e/ou microscópio utilizado) e o critério de classificação de resultados baciloscópicos que causa maior dificuldade na caracterização de proficiência. MÉTODOS: Quatrocentas baciloscopias de escarro para diagnóstico da tuberculose foram analisadas, mediante leituras duplo-cegas, por seis profissionais que usualmente efetuam leitura/supervisão de baciloscopias realizadas na rede básica de saúde. A amostragem foi determinada visando a obter, no mínimo, 90% de concordância nas leituras duplo-cegas, erro alfa de 5% e precisão de 3%. Os resultados foram analisados mediante concordância observada/índice kappa. RESULTADOS: Constataram-se 13 erros de transcrição dos resultados (0,27%). A concordância aumentou quando as três categorias distintas de resultados baciloscópicos positivos (BAAR+, BAAR++ e BAAR+++) foram agrupadas ou foram excluídos da análise os exames com resultados inconclusivos. A quantificação da carga bacilar foi o critério de classificação que causou maior dificuldade para caracterização de proficiência. A qualidade do microscópio utilizado foi importante para o aumento da concordância. A estabilização dos valores de concordância somente foi obtida a partir da leitura de 75 baciloscopias. CONCLUSÕES: O uso de leituras baciloscópicas duplo-cegas utilizando-se painel composto por 75 lâminas (36 negativas, 4 inconclusivas e 35 positivas) mostra-se adequado para caracterizar a proficiência em baciloscopia para diagnóstico da tuberculose quando essa proficiência pretende reproduzir a rotina laboratorial.

OBJECTIVE: To propose a methodology for characterizing proficiency in sputum smear microscopy for acid-fast bacilli (AFB) in the diagnosis of tuberculosis and to determine the number of microscopies necessary to establish this proficiency, as well as the quality of the transcription of results, the causes of the discrepancies in the readings (rater or microscope used), and the criterion for classification of microscopy results that poses the most difficulty in characterizing proficiency. METHODS: Four hundred sputum smear microscopies for the diagnosis of tuberculosis were analyzed through double-blind readings by six professionals who usually read/supervise microscopies performed in public health care facilities. The sample was stratified to obtain, at least, a reliability of 90% in the double-blind readings, an alpha error of 5%, and a precision of 3%. The results were analyzed using observed reliability and the kappa index. RESULTS: Thirteen errors (0.27%) were found in the transcription of results. Reliability increased when the three distinct categories of positive results (AFB+, AFB++, and AFB+++) were grouped or when inconclusive results were excluded from the analysis. The quantification of the bacterial load was the classification criterion that posed the most difficulty in establishing proficiency. Using higher quality microscopes increased reliability. Reliability values stabilized only from the reading of 75 microscopies onward. CONCLUSIONS: Double-blind sputum smear microscopy readings using a panel containing 75 slides (36 negative, 4 inconclusive, and 35 positive) proved to be appropriate for characterizing proficiency in sputum smear microscopy for the diagnosis of tuberculosis when such proficiency is intended to reproduce laboratory routine.

Foi elaborado um método de cultivo alternativo, denominado por nós PKO (iniciais referentes à Petroff, Kudoh e Ogawa), para o isolamento do Mycobacterium tuberculosis em amostras de escarro para o diagnóstico da tuberculose pulmonar (TB). Para validação da técnica, amostras de escarro de pacientes suspeitos de TB foram submetidas aos métodos de baciloscopia (direta e pós-concentração), PKO, Swab e Petroff. A análise comparativa entre o método de Petroff e o PKO mostrou paridade de resultados em relação ao isolamento e número de colônias de M. tuberculosis. Porém, pelo método PKO, 65% das cepas isoladas foi detectada em um período <FONT FACE=Symbol>£</FONT>15 dias, enquanto que pelo método de Petroff a melhor detecção ocorreu em um intervalo de 16-29 dias (71%). O tempo médio de isolamento pelo PKO é somente superior ao sistema comercial Bactec 460TB em amostras positivas na baciloscopia. A exclusão da etapa de neutralização de pH no método PKO reduz a manipulação das amostras, diminui o tempo de execução do cultivo em relação ao de Petroff e facilita o treinamento de profissionais que realizam o diagnóstico laboratorial da TB.

We elaborated an alternative culture method, which we denominated PKO (initials in tribute of respect to Petroff, Kudoh and Ogawa), for isolating Mycobacterium tuberculosis from sputum for diagnosis of pulmonary tuberculosis (TB), and to compare its performance with the Swab and Petroff methods. For the technique validation, sputum samples from patients suspected of pulmonary TB cases were examined by acid-fast microscopy (direct and concentrated smear), PKO, Swab and Petroff methods. We found that Petroff and PKO methods have parity in the effectiveness of M. tuberculosis isolation. However, by the PKO method, 65% of isolated strains were detected in a period of <FONT FACE=Symbol>£</FONT>15 days, while by the Petroff method the best detection was in an interval of 16-29 days (71%). In positive smear samples, the average time of PKO isolation is only superior to the one related for Bactec 460TB. In conclusion, the exclusion of the neutralization stage of pH in the PKO reduces the manipulation of the samples, diminishes the execution time of the culture according to the Petroff method and facilitates the qualification of professionals involved in the laboratorial diagnosis of Tuberculosis.

OBJETIVO: Avaliar a acurácia dos métodos bacteriológicos e da reação em cadeia da polimerase com oligonucleotídeos específicos para a IS6110 do complexo Mycobacterium tuberculosis, em amostras de escarro de indígenas e não indígenas. MÉTODOS: Analisaram-se 214 amostras de escarro (154 de indígenas e 60 de não indígenas) quanto à acurácia da baciloscopia direta e pós-concentração, cultivo e reação em cadeia da polimerase. RESULTADOS: Ambos os métodos baciloscópicos, quando comparados com o cultivo ou a reação em cadeia da polimerase foram de baixa sensibilidade. A especificidade variou de 91% a 100%, sendo a baciloscopia pós-concentração menos específica. Nas amostras indígenas constataram-se três vezes mais isolamentos de micobactérias não tuberculosas do que nas não indígenas. Resultados da reação em cadeia da polimerase aparentemente falsos-positivos e negativos foram encontrados com maior freqüência na população indígena. CONCLUSÃO: Baciloscopias positivas para bacilos álcool-acidorresistentes com isolamento de micobactérias não tuberculosas e reação em cadeia da polimerase positiva estabelecem as hipóteses de: existência na Amazônia de espécies de micobactérias não tuberculosas com regiões do DNA homólogas à IS6110 ou ainda que possuam a IS6110, até então só descrita no complexo M. tuberculosis; impossibilidade de isolamento do M. tuberculosis pelo crescimento mais rápido de micobactérias não tuberculosas presentes nas amostras de escarro, por colonização da orofaringe ou da lesão tuberculosa; presença de DNA de M. tuberculosis devida a antecedente de tuberculose. A ausência de positividade em resultados bacteriológicos com reação em cadeia da polimerase positiva sugere questões técnicas inerentes aos métodos bacteriológicos ou precedentes de tuberculose.

OBJECTIVE: To evaluate the accuracy of bacteriological methods and of polymerase chain reaction (with primers specific for IS6110 of the Mycobacterium tuberculosis complex) in testing sputum samples from indigenous (Amerindian) and non-indigenous patients. METHODS: A total of 214 sputum samples (154 from indigenous patients and 60 from non-indigenous patients) were analyzed in order to determine the accuracy of smear microscopy (direct and concentrated versions) for acid-fast bacilli, culture, and polymerase chain reaction. RESULTS: Both microscopy methods presented low sensitivity in comparison with culture and polymerase chain reaction. Specificity ranged from 91% to 100%, the concentrated acid-fast smear technique being the least specific. Nontuberculous mycobacteria were isolated three times more frequently in samples from indigenous patients than in those from non-indigenous patients. False-positive and false-negative polymerase chain reaction results were more common in the indigenous population. CONCLUSION: Positivity and isolation of nontuberculous mycobacteria in the acid-fast smear in conjunction with polymerase chain reaction positivity raise the following hypotheses: nontuberculous mycobacteria species with DNA regions homologous to, or even still possessing, the M. tuberculosis IS6110 exist in the Amazon; colonization of the oropharynx or of a tuberculous lesion accelerates the growth of the nontuberculous mycobacteria present in the sputum samples, making it impossible to isolate M. tuberculosis; A history of tuberculosis results in positivity for M. tuberculosis DNA. The absence of bacteriological positivity in the presence of polymerase chain reaction positivity raises questions regarding the inherent technical characteristics of the bacteriological methods or regarding patient history of tuberculosis.

INTRODUÇÃO: Há diferentes primers sendo testados para a detecção do DNA do Mycobacterium tuberculosis. A acuidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) depende da existência da seqüência alvo no bacilo e de os testes serem realizados em cepas isoladas ou em amostras clínicas. OBJETIVO: Verificar a presença das seqüências de DNA alvo mais relatadas na literatura para o diagnóstico da tuberculose em amostras clínicas usando como controle positivo as respectivas cepas de M. tuberculosis isoladas. MÉTODO: Oitenta e uma amostras clínicas de pacientes com suspeita de tuberculose foram submetidas à baciloscopia e cultivo. A técnica de PCR foi realizada nas amostras clínicas e cepas isoladas com primers específicos para os seguintes alvos: IS6110, 65 kDa, 38 kDa e MPB64. RESULTADOS: Em 24 amostras com baciloscopia e cultivo negativos, a PCR também foi negativa com todos os primers testados. Em 19 amostras com baciloscopia positiva e nas cepas isoladas obteve-se 100% de resultados positivos nas PCR, exceto nas PCR em amostras clínicas com os primers para a seqüência MPB64 (89,4%). Em 38 amostras com baciloscopia negativa e cultivo positivo, as PCR tiveram resultados variáveis, sendo que os primers específicos que amplificam o fragmento de 123 pb da seqüência IS6110 foram os que forneceram os maiores percentuais de positividade (92,1%), concordância diagnóstica (0,9143), co-positividade (94,7%) e co-negatividade (100%). CONCLUSÃO: As seqüências IS6110, 38 kDa, MPB64 e 65 kDa foram encontradas no genoma de todas as cepas de M. tuberculosis isoladas desses pacientes do Estado do Amazonas. O protocolo utilizado no processamento das amostras clínicas e os primers específicos utilizados para amplificação do fragmento de 123 pb da seqüência IS6110 demonstraram maior eficiência no diagnóstico da tuberculose pulmonar (paucibacilar) em comparação com a literatura.

BACKGROUND: Various primers are being tested for the detection of Mycobacterium tuberculosis DNA. The accuracy of the polymerase chain reaction (PCR) depends on the target sequence used and whether the test will be performed in culture or in clinical specimens. OBJECTIVES: To identify DNA sequences, specifically those commonly reported as targets for diagnosis of tuberculosis (TB), in clinical samples of M. tuberculosis strains. METHOD: Eighty-one clinical samples from suspected TB patients were initially processed and submitted to bacilloscopy (smear) and culture, and PCR was performed with specific primers for the following targets: IS6110, 65 kDa, 38 kDa and MPB64. RESULTS: Smear and culture results were negative in 24 samples, as was the PCR. The 19 samples testing smear positive, as well as the isolated strains, were 100% positive on PCR, with the exception of the 89.4% result from PCR with MPB64 primers. In the 38 smear negative and culture positive samples, PCR results were inconsistent. The primers specific for amplifying the 123 bp IS6110 fragment gave the highest positivity (92.1%), diagnostic agreement (0.9143), co-positivity (94.7%) and co-negativity (100%). CONCLUSION: The IS6110, 38 kDa, MPB64 and 65 kDa sequences were found in the genome of all M. tuberculosis strains isolated in patients from the state of Amazonas. The protocol for processing the clinical samples prior to PCR analysis and the specific primers used to amplify the 123bp IS6110 fragment showed a greater efficiency in diagnosing pulmonary (paucibacillary) tuberculosis in comparison to published data.

RESUMOSão apresentadas as espécies micobaterianas mais comumente isoladas de secreções pulmonares de pacientes com sintomatologia respiratória, residentes no Estado do Amazonas. O alto percentual de isolamentos (25,4%) e as espécies obtidas indicam uma forte relação de contaminação do homem pelo meio-ambiente. Entre as espécies isoladas, 7 são consideradas micobactérias potencialmente patogênicas. Isto indica a necessidade de realizar-se estudos de sensibilização na população, através de PPDs específicos para as espécies relatadas já que , algumas destas espécies podem interferir com os programas atuais e futuros de vacinação contra a Tuberculose e Hanseníase.

SUMMARYMycobacteria which are most commonly isolated in pulmonary secretions of patients with respiratory symptoms living in the State of Amazonas are given. The high percentage of isolates (25,4) and the species obtained indicate a strong relationship of contamination of man by the environment. Among the species isolated, seven of them are considered potentially pathogenic mycobacteria. Since some of these species may interfere with present and further vaccination programs against Tuberculosis and Leprosy, these investigations indicate a necessity of carrying out studies of population awareness against specific PPD's prepared from the same species.

Resumo São apresentados os dados coletados em um levantamento sobre a qualidade de água do rio Negro, nas proximidades da cidade de Manaus, Amazonas. Foram medidos alguns parâmetros físico químicos, tais como temperatura, pH, condutividade elétrica, transparência de Secchi e avaliadas as condições microbiológicas da quantidade de bactérias saprobiontes totais e coliformes totais, durante o ano de 1977. O trabalho foi realizado com coletas mensais, em nove locais ao longo do rio e em dois igarapés que margeiam a cidade, com amostragens em duas profundidades. Discute-se a importância dos resultados sob o ponto de vista sanitário e ressalta-se a capacidade de autopurificação do rio.

Summary This paper presents a survey of some aspects of Rio Negro water quality in the vicinity of Manaus, Amazonas, Brazil. Measurements of temperature. pH, electrical conductivity, light penetration (Secchi), saprophyte and total coliform bacteria, were carried out from January through December of 1977. The samples were collected at two depths at eleven places along the river and from two streams at the outskirts of the town. The results are discussed from a sanitary point of view and the autopurification capacity of the river is emphasized.